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类器官——从 2D 到 3D 的入门 | MCE

来源:内饰   2024年01月29日 12:16

分选以富集小鼠。由来 ESC 和 iPSC 的类脑部向所需要的胚系由顺利完形同定向分立,最终聚集地归因于伸缩的球状微,随后被嵌入线粒微外基质开始类脑部培育造出(如平面图 5)。

平面图 5. 从 ASCs 转化形同类脑部的方式示意平面图[14]

将小肠有组织制形同几块(隐窝复合造出来可做备选)。将切割有组织与诸如胶原酶等在37℃下孵育,演化形同线粒微液氨。将单线粒微牛痘在 Matrigel 之中,并在内含特定有组织酪氨酸的培育造出基之中生长。

2) 可隐身的培育造出系由统实现定向分立:类脑部通常在线粒微外基质 (ECM) 之中顺利完形同培育造出,ECM 周围是补足了类脑部类别特定的自然生态位 (Niche) 变异的培育造出基。常见的 Niche 和 ECM 变异有数了 R-spondin、EGF、Noggin、Activin A、Collagen 等。

3) 小鼠在类脑部之中始终保持并长存,即始终保持“拓性”,并且不断归因于分立的多种线粒微类别配子,这些线粒微类别自有组织形同特殊性 3D 结构。另外,3D 类脑部可以解离,并镀上到涂有接合处基质 (MG) 或水溶性 (collagen) 的鞘支持物上,演化形同 2D 单层类脑部数学模型。

平面图 6. 原代有组织和 ESCs/iPSCs 归因于和培育造出类脑部[6]

类脑部可青年学生地分立,或通过添加相应的分立变异和/或已将推动小鼠结构上的变异,以抑止分立得到所需要的谱系由或线粒微类别。

类脑部的培育造出离不开抑止线粒微分立的线粒微变异,MCE 提供者各种类脑部培育造出用线粒微变异,高来生性、锑、低内毒素!

线粒微变异

Human EGF

上皮有组织酪氨酸;EGF 与 EGF 受微转化,抑止炎症性变化。

胃肠胃、肝、甲状腺、脑等类脑部培育造出所需要变异。

Human FGF-2/4/9/10

FGFs 在后期生长发育之中对之腹腔抑止、肢微生长发育、中枢神经系统抑止和中枢神经系统生长发育有关键性效用。在形同熟有组织之中,FGFs 对血管转化形同、角质演化形同线粒微有组织和剧痛脊椎过程至关关键性。

例如 FGF-basic (FGF-2)、FGF-10 是常见的类脑部培育造出 Niche 变异,如肝类脑部、类脑部。

Human HGF

HGF/Met 信号通路推动癌症的生长、摧残和移入。

HGF 可充当肝线粒微的有性生殖原,使用肝类脑部培育造出。

Human Wnt3a

Wnt 进行调控线粒微生长发育、裂解、分立、粘附、极性、线粒微-线粒微通信系由统、猎食和自我愈来愈新基本功能。

Wnt3a 在类脑部的扩展战斗能力之中起着关键性的效用,是最常用培育造出变异之一。

Human BMP-4

BMP 在受精卵时有发生、生长发育和维持有组织稳态之中起着至关关键性的效用。

粘液实验之中,BMP-2 和 BMP-4 被广泛应使用抑止多能小鼠 (iPSC) 和受精卵小鼠 (ESC) 归因于肝线粒微。

Human Noggin

痕形态时有发生酶的内源性消除剂,调控线粒微分立、裂解和线粒微分裂。

Noggin 是最基础的类脑部培育造出变异之一。

Human DKK-1

DKK-1 是近似于的 Wnt 消除剂,可抑止脑部前微自有组织。

小分子消除剂

Y-27632 dihydrochloride

Rho 还原酶消除剂;常使用类脑部构建。

A 83-01

ALK4/5/7 消除剂;消除类脑部的裂解。

参考文献

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14. Hans Clevers. COVID-19: organoids go viral. Nat Rev Mol Cell Biol. 2020 Jul;21(7):355-356.

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